Inokulasi Mikroorganisme: Perbedaan antara revisi

'''PenanamanInokulasi bakteri''' atau biasa disebut juga '''inokulasiMikroorganisme''' adalah pekerjaan memindahkan bakteri dari medium yang lama ke medium yang baru dengan tingkat '''ketelitian yang sangat tinggi'''., Untukuntuk melakukan penanaman bakteri (inokulasi) terlebih dahulu diusakan agar semua alat yang ada dalam hubungannya dengan medium agar tetap '''steril''', hal ini agar menghindari terjadinya kontaminasi .<ref>{{Cite book|title=Dasar-Dasar Mikrobiologi|last=Dwidjoseputro|first=D|date=1994|publisher=Djambatan|isbn=|location=Jakarta|pages=|url-status=live}}</ref>.

# '''Menyiapkan Ruangan'''. '''Ruangan tempat inokulasi''' harus bersih dan bebas angin. Dinding ruangan yang basah menyebabkan butir-butir debu menempel. PadaSaat waktumenginokulasi, mengadakan inokulasi,lebih baik sekali bilajika meja tempat inokulasi didasari dengan kain basah. Pekerjaan inokulasi dapat dilakukan dalam suatu '''kotak berkaca ''(ent-kas).'''.<ref Di labolatorium untuk membuka [[vaksin]], [[serum]], dan sebagainya, udara yang masuk ke dalam ruangan dilewatkan saringan yang disinari dengan [[sinar ultra violet]].name=":0" />

# '''Pemindahan dengan kawat inokulasi'''. Ujung kawat inokulasi sebaiknya dari [[platina]] atau [[nikrom]];, ujung kawat boleh lurus, boleh juga berupa kolongan yang berdiameter 1-3 1–3&nbsp;mm. Lebih dahulu ujung kawat ini dipijarkan, sedang sisanya sampai tangkai cukup dilewatkan nyala api saja. Setelah dingin kembali, ujung kawat itu disentuhkan pada suatu '''koloni.''' Mulut tabung tempat pemiaraan itu dipanasi jugadipanaskan setelah sumbatnya diambil. Setelah pengambilan '''inokulum (sampel bakteri)''' selesai, mulut tabung dipanasikembali lagidipanaskan kemudian disumbat seperti semula. Ujung kawat yang membawakan '''inokulum''' tersebut digesekkan pada medium baru atau pada suatu kaca benda, kalau tujuannya memang akan membuat suatu sediaan.<ref name=":0" />

# '''Pemindahan dengan Pipet.''' Cara ini dilakukan misalnya pada penyelidikan air minum atau penyelidikan susu., Untuk itu diambillahmisalnya 1 ml contoh (sampel) untuk diencerkan dengan 99 ml air murni yang disterilkan. DalamSaat pengenceran ini tergantung dari keadaan air atau susu yang diselidiki. Kemudian diambil 1 ml dari enceran ini untuk dicampuradukkan dengan medium agar-agar yang masih dalam keadaan cair. Lalu agar-agar yang masih encer ini dituangkan di cawan petri. Setelah agar-agar membeku, maka [[cawan petri]] yang berisi piaraan baru itu disimpan dalam tempat yang aman, misalnya di dalam [[inkubator]]. Penyimpanan cawan dilakukan secara terbalik, yakni permukaan medium menghadap ke bawah, hal ini untuk menghindari tetesnya air yang mungkin melekat pada dinding dalam tutup cawan. Piaraan yang diperoleh dengan jalan seperti tersebut di atasini, terkenaldikenal dengan nama '''"piaraan adukan'''.", Dengandengan cara ini bakteri yang diinokulasi tadi dapat menyebar luas keseluruh medium. Bakteri yang '''aerob''' maupun '''anaerob''' dapat tumbuh di situ, dan banyaknya banyaknya koloni dapat dihitung dengan mudah .<ref name=":0">{{Cite book|title=Mikrobiologi Umum|last=Waluyo|first=Lud|date=2007|publisher=UNM Press|isbn=|location=Malang|pages=|url-status=live}}</ref>

DiMikrob di alam bebas tidak ada '''mikroba''' yang hidup tersendiri terlepas dari spesies yang lain. Sering kali [[mikrobamikrob]]a [[patogen]] kedapatan secara bersama-sama, dengan '''mikrobamikrob satroba ([[sakrobakteri]])'''. Dalam teknik biakan murni tidak saja diperlukan bagaimana memperoleh suatu bakteri murni, tetapi juga bagaimana memelihara serta mencegah pencemaran dari luar. Medium untuk membiakan mikrobamikrob haruslah steril sebelum digunakan., '''Pencemaranmenghindari pencemaran (kontaminasi)''' dari luar terutama berasal dari udara yang mengandung banyak [[mikroorganisme]] .<ref name=":0" />

Untuk mengadakan isolasi mikrobamikrob dari suatu media dapat digunakan beberapa perangkat prosedur antara lain adalahsebagai berikut:

# '''Metode taburan ''(pour plate method)''' atau cara penuangan,. Penggunaan media padat dalam teknik isolasi bakteri dalam kultur murni, merupakan suatu prosedur yang baik dan sederhana. Dalam metodeMetode taburan ini, suspensi bakteri dalam cairan dicampur dengan “agar” yang sudah dileburkan pada suhu kira-kira 50⁰C. Kemudian agarnya dituangkan ke dalam piring petri, dibiarkan mendingin supaya membeku dan '''diinkubasikan'''. Dalam metode ini bakteriBakteri akan tumbuh membentuk koloni di bawah atau di atas permukaan agar. Koloni ini diambil 1 ose (1 loop) dan disuspensikan lagi pada media dalam piring petri yang [[steril]] dan cara ini dilakukan sampai beberapa kali, sehingga pada satu piring petri hanya terdapat satu jenis mikroba.<ref name=":1">{{Cite book|title=Pengantar Mikrobiologi|last=Tarigan|first=Jeneng|date=1988|publisher=Depdikbud|isbn=|location=Jakarta|pages=|url-status=live}}</ref>

# '''Metode sebaran ''(spread plate method)''' atau cara pengenceran. UntukBakteri anaerob yang lebih peka terhadap [[oksigen]], lebih disukaicocok modifikasimenggunakan metode biakan kocok pengenceran. Sebuah tabung berisi agar cair lagi dingin diinokulasikan dan dicampurkan, dan kira-kira sepersepuluh dari isinya dipindahkan ke tabung kedua, lalaulalu dicampurkan dan digunakan untuk menginokulasikan tabung ketiga dengan cara yang sama. Setelah 6-10 kali dipersiapkan pengenceran yang berturut-turut, tabung itu dengan cepat didinginkan dan ditutup rapat dengan menuangkan selapis minyak ter dan paraffin yang steril pada permukaannya, jadi mencegah masuknya udara pada gumpalan agar dank arena itu tidak mudah dicapai untuk dipindahkan .<ref>{{Cite book|title=Mikrobiologi Umum|last=Schlegel|first=H.G.|date=1994|publisher=UGM Press|isbn=|location=Yogyakarta|pages=|url-status=live}}</ref>

# '''Metode goresan ''(streak plate method)''' atau cara penggesekan. Cara gores pada umumnya merupakan metode semai yang paling bergunaumum digunakan. Dawai bengkok yang steril dicelupkan ke dalam suspensi organisme yang diencerkan, lalu dibuat serangkaian goresan sejajar yang tidak saling menutupi di atas permukaan agar yang telah padat pada inokulum menjadi makin encer dengan setiap goresan yang berturut-turut, sehingga biarpun goresan pertama menghasilkan pertumbuhan yang rapat, koloni yang terisolasi dengan baik tumbuh di sepanjang garis yang lebih kemudian digoreskan.<ref name=":1" />