ELISA: Perbedaan antara revisi
Konten dihapus Konten ditambahkan
k ~ref |
Fitur saranan suntingan: 2 pranala ditambahkan. |
||
Baris 40:
== Prinsip ==
Sebagai kadar analisis [[biokimia]] dan teknik "lab basah", ELISA mengidentifikasi kehadiran suatu analit dalam sampel yang berbentuk cair.<ref>{{Cite book|last=Msagati|first=Titus A. M.|date=2017-10-16|url=https://books.google.co.id/books?id=P2Q6DwAAQBAJ&pg=PT229|title=Food Forensics and Toxicology|location=Johannesberg|publisher=John Wiley & Sons|isbn=978-1-119-10138-3|pages=220|language=en|url-status=live}}</ref><ref>{{Cite journal|last=Lakshmipriya|first=Thangavel|last2=Gopinath|first2=Subash C. B.|last3=Hashim|first3=Uda|last4=Murugaiyah|first4=Vikneswaran|date=2017-12-01|title=Multi-analyte validation in heterogeneous solution by ELISA|url=http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0141813017320123|journal=International Journal of Biological Macromolecules|language=en|volume=105|issue=|pages=1|doi=10.1016/j.ijbiomac.2017.07.115|issn=0141-8130}}</ref> Analit ini terus menerus digunakan oleh reagen yang tetap cair selama analisis.<ref>{{Cite book|last=Austin|first=Rowan|date=2018-12-19|url=https://books.google.co.id/books?id=1ePEDwAAQBAJ&pg=PA260|title=Enzyme Immobilization|location=Waltham Abbey Essex|publisher=Ed-Tech Press|isbn=978-1-83947-346-3|pages=260|language=en|url-status=live}}</ref> Reagen ini juga akan tetap berada pada ruang reaksi atau plat untuk menjaga reaktan agar tidak tumpah.<ref>{{Cite book|last=Crowther|first=John R.|date=1995|url=https://doi.org/10.1385/0-89603-279-5:1|title=ELISA: Theory and Practice|location=Totowa, NJ|publisher=Humana Press|isbn=978-1-59259-529-7|editor-last=Crowther|editor-first=John R.|series=Methods in Molecular Biology™|pages=1–34|language=en|doi=10.1385/0-89603-279-5:1}}</ref> Hal ini kontras dengan teknik "lab kering" yang menggunakan strip kering. Walaupun sampelnya merupakan cairan, analisisnya tetaplah kering. Contohnya adalah seperti menggunakan [[Reflektor|reflektometri]].<ref>{{Cite book|last=Sonntag|first=Oswald|date=1993-11-09|url=https://books.google.co.id/books?id=ZW0UWoZNhpEC&pg=PA2|title=Dry Chemistry: Analysis with Carrier-bound Reagents|location=Amsterdam|publisher=Elsevier|isbn=978-0-08-088736-4|pages=2|language=en|url-status=live}}</ref>
Sebagai kadar heterogen, ELISA membagi beberapa komponen dari campuran reaksi analitis dengan mengadsorpsi beberapa komponen reaksi menjadi fase padat yang secara fisik terimobilisasi.<ref>{{Cite book|last=Crowther|first=John R.|date=1995|url=https://books.google.co.id/books?id=AodkPkz_7NEC&pg=PA63|title=ELISA: Theory and Practice|location=New Jersey|publisher=Springer Science & Business Media|isbn=978-1-59259-529-7|pages=63|language=en|url-status=live}}</ref> Pada ELISA, sampel cair ditambahkan ke dalam fase padat stasioner dengan sifat ikatan khusus dan dilanjutkan dengan ditambahkannya beberapa reagen cair, lalu diinkubasi, dan dicuci, sehingga dapat diamati perubahan optis (misalnya perubahan warna).<ref>{{Cite book|last=Ansari|first=Mahmood-Ur-Rahman|date=2018-07-18|url=https://books.google.co.id/books?id=Wr2QDwAAQBAJ&pg=PA54|title=Protein-Protein Interaction Assays|location=London|publisher=IntechOpen|isbn=978-1-78923-390-2|pages=54|language=en|url-status=live}}</ref> Perubahan warna inilah yang nantinya akan dianalisis.<ref>{{Cite book|last=Crowther|first=J. R.|date=2001|url=https://books.google.co.id/books?id=e39weLL_FL8C&pg=PA53|title=The ELISA Guidebook|location=New Jersey|publisher=Springer Science & Business Media|isbn=978-1-59259-049-0|pages=53-60|language=en|url-status=live}}</ref> Analisis kuantitatif biasanya mendeteksi intesitas cahaya yang tembus oleh [[spektrofotometri]]. Sensitivitas dari deteksi ini biasanya tergantung dari amplifikasi sinyal selama reaksi. Karena reaksi enzim diketahui mengamplifikasi sinyal dengan baik, sinyal yang dihasilkan oleh enzim ini akan memungkinkan kuantifikasi yang akurat.<ref>{{Cite book|last=Vo-Dinh|first=Tuan|date=2003-03-26|url=https://books.google.co.id/books?id=Pl4wsXCiZdQC&pg=SA55-PA4|title=Biomedical Photonics Handbook|location=|publisher=CRC Press|isbn=978-0-203-00899-7|pages=55-4|language=en|quote="(..) Here, the amplifications occur as the enzyme converts substrate to product."|url-status=live}}</ref> Hal inilah yang memberi nama "taut enzim" atau ''enzyme linked'' pada ELISA. Konsentrasi warna ini akan berbanding lurus dengan konsentrasi analit.<ref>{{Cite book|last=Nollet|first=Leo M. L.|last2=Toldra|first2=Fidel|date=2016-04-19|url=https://books.google.co.id/books?id=oGXfsKDP4lcC&pg=PA841|title=Safety Analysis of Foods of Animal Origin|location=|publisher=CRC Press|isbn=978-1-4398-4819-7|pages=841|language=en|quote="(...) The amount of label present at completion of the assay (and color) is directly proportional to the analyte concentration."|url-status=live}}</ref> Analit ini juga biasa disebut sebagai ligan karena akan mengikat secara spesifik pada reagen detektor, sehingga ELISA masuk ke dalam kategori kadar pengikatan ligan.
== Penggunaan ==
Karena ELISA dapat digunakan untuk melihat adanya antigen atau antibodi dalam sampel, metode ini berguna untuk menentukan konsentrasi antibodi (seperti pada [[Tes HIV]] <ref>{{Cite web|title=Screening and diagnosis for HIV: MedlinePlus Medical Encyclopedia|url=https://medlineplus.gov/ency/article/003538.htm|website=medlineplus.gov|language=en|access-date=2021-01-18}}</ref> atau pada skrining [[Penyakit koronavirus 2019|COVID-19]] <ref>{{Cite journal|last=Jääskeläinen|first=Anne J.|last2=Kekäläinen|first2=Eliisa|last3=Kallio-Kokko|first3=Hannimari|last4=Mannonen|first4=Laura|last5=Kortela|first5=Elisa|last6=Vapalahti|first6=Olli|last7=Kurkela|first7=Satu|last8=Lappalainen|first8=Maija|date=2020-05-07|title=Evaluation of commercial and automated SARS-CoV-2 IgG and IgA ELISAs using coronavirus disease (COVID-19) patient samples|url=https://www.eurosurveillance.org/content/10.2807/1560-7917.ES.2020.25.18.2000603|journal=Eurosurveillance|language=en|volume=25|issue=18|pages=1|doi=10.2807/1560-7917.ES.2020.25.18.2000603|issn=1560-7917|pmc=PMC7219034|pmid=32400364}}</ref>). Selain itu, ELISA juga digunakan untuk mendeteksi [[alergen]] makanan yang potensial seperti susu, kacang, dan telur.<ref>{{Cite web|title=Understanding How ELISA Methods Work to Detect Food Allergens|url=https://www.foodqualityandsafety.com/article/understanding-how-elisa-methods-work-to-detect-food-allergens/|website=Food Quality & Safety|language=en-US|access-date=2021-01-18}}</ref> ELISA juga digunakan sebagai tes darah serologis untuk medeteksi [[penyakit seliak]].<ref>{{Cite journal|last=Porcelli|first=Brunetta|last2=Ferretti|first2=Fabio|last3=Vindigni|first3=Carla|last4=Terzuoli|first4=Lucia|date=2016|title=Assessment of a Test for the Screening and Diagnosis of Celiac Disease|url=https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/jcla.21816|journal=Journal of Clinical Laboratory Analysis|language=en|volume=30|issue=1|pages=65–70|doi=10.1002/jcla.21816|issn=1098-2825|pmc=PMC6807240|pmid=25385391}}</ref> ELISA juga bisa digunakan pada toksikologi seabgai skrining awal untuk mendeteksi beberapa jenis obat-obatan.<ref>{{Cite journal|last=Kahl|first=Kristin W.|last2=Seither|first2=Joshua Z.|last3=Reidy|first3=Lisa J.|date=2019-10-17|title=LC-MS-MS vs ELISA: Validation of a Comprehensive Urine Toxicology Screen by LC-MS-MS and a Comparison of 100 Forensic Specimens|url=https://academic.oup.com/jat/article/43/9/734/5550874|journal=Journal of Analytical Toxicology|language=en|volume=43|issue=9|pages=734–745|doi=10.1093/jat/bkz066|issn=0146-4760}}</ref>
ELISA adalah tes skrining pertama yang digunakan secara luas untuk HIV karena CDC mengatakan ELISA memiliki sensitivitas yang tinggi.<ref>{{Cite book|last=Hammet|first=Theodore|date=1987|url=https://books.google.co.id/books?id=9_TEZt6pSGgC&pg=PA35|title=AIDS in Correctional Facilities: Issues and Options|location=Washington D.C|publisher=U.S Department of Justice|isbn=|pages=35|language=en|url-status=live}}</ref> Selain itu, ELISA memiliki sensitifitas 84.2% untuk mendeteksi antibodi yang melawan [[SARS-CoV-2]] pada populasi yang bergejala.<ref>{{Cite journal|last=MacMullan|first=Melanie A.|last2=Ibrayeva|first2=Albina|last3=Trettner|first3=Kylie|last4=Deming|first4=Laura|last5=Das|first5=Sudipta|last6=Tran|first6=Frances|last7=Moreno|first7=Jose Ricardo|last8=Casian|first8=Joseph G.|last9=Chellamuthu|first9=Prithivi|date=2020-11-30|title=ELISA detection of SARS-CoV-2 antibodies in saliva|url=https://www.nature.com/articles/s41598-020-77555-4|journal=Scientific Reports|language=en|volume=10|issue=1|pages=20818|doi=10.1038/s41598-020-77555-4|issn=2045-2322|pmc=PMC7705674|quote="(..) it is possible to detect antibodies against SARS-CoV-2 in saliva samples with a sensitivity of 84.2%"}}</ref>
| |||