Turnamen dimulai dengan 16 klub bertanding di babak pertama.<ref name="Reglamento">{{es icon}} {{cite web |url=http://img.mazimou.com:90/3749/documents/310.pdf |title=Reglamento de la Copa Nissan Sudamericana de Clubes 2010 |publisher=[[CONMEBOL]] |date=April 28, 2010 |accessdate=May 18, 2010 |archive-date=2010-10-10 |archive-url=https://web.archive.org/web/20101010231359/http://img.mazimou.com:90/3749/documents/310.pdf |dead-url=yes }}</ref><ref>{{es icon}} {{cite web |url=http://img.mazimou.com:90/3749/documents/139.pdf |title=Reglamento de la Copa Santander Libertadores de America 2010 |publisher=[[CONMEBOL]] |date=April 28, 2010 |accessdate=May 18, 2010 |archive-date=2010-02-14 |archive-url=https://web.archive.org/web/20100214231657/http://img.mazimou.com:90/3749/documents/139.pdf |dead-url=yes }}</ref> 8 klub yang menang bergabung dengan 22 klub lainnya pada babak kedua.<ref name="Reglamento" /> Pemenang pada babak kedua bersama dengan juara bertahan kemudian bertanding pada babak 16 besar hingga babak final.<ref name="Reglamento" />
Pada setiap babaknya, keadaan seri atau imbang ditentukan melalui poin, kemudian selisih gol, gol tandang, lalu adu penalti jika diperlukan.<ref name="Reglamento" /> Pada babak final, peraturan gol tandang digantikan dengan perpanjangan waktu dua kali 15 menit.<ref name="Reglamento" />
