Tebu NXI-4T Toleran Kekeringan: Perbedaan antara revisi

Tebu PRG transgenik kekeringan NXI-4T dihasilkan melalui metode [[transformasi]] genetik di Laboratorium [[Bioteknologi]] PTPN XI (Persero) sejak tahun 1999 bekerja sama dengan [[Ajinomoto|PT. Ajinomoto Company International]].<ref name="Johan"/> Materi genetik yang digunakan untuk merakit tebu transgenik toleran kekeringan NXI-4T adalah gen ''betA'' yang menyandikan enzim ''[[choline dehydrogenase]]'' (CDH) dan dirancang dalam [[plasmid]] pMLH 2113.<ref name="Johan"/> Sekuen gen ''betA'' yang digunakan merupakan dari bakteri ''[[Rhizobium meliloti]]''.<ref name="Johan"/> Dalam konstruksi tersebut terlihat bahwa gen ''betA'' dikendalikan oleh [[promoter]] [[DNA]] 35S-CaMV (''Cauliflower Mozaic Virus'') dan gen penanda ketahanan terhadap antibiotik ''higromisin'' (hptII).<ref name="Johan"/> Konstruk pMLH 2113 yang mengadung gen ''betA'' kemudian ditransformasikan ke sel bakteri ''[[Agrobacterium tumefaciens]]'' [[galur]] LBA4404 dan digunakan untuk transformasi genetik tanaman tebu.<ref name="Johan"/>

 

''Agrobacterium tumefaciens'' merupakan bakteri Gram-negatif yang umumnya ditemukan pada tanah yang menyebabkan penyakit [[tumor mahkota empedu]].<ref name="Madigan">{{en}} Madigan MT, Martinko JM, Bender KS, Buckley DH, Stahl DA. 2012. ''Brock Biology of Microorganisms''. Ed ke-14. Glenview: Pearson.</ref> ''Agrobacterium'' sering digunakan dalam proses perakitan tanaman transgenik melalui proses transformasi.<ref name="Madigan"/> Plasmid yang digunakan dikonstruksi dari ''Escherichia coli'' umumnya lalu di[[konjugasi]]kan ke dalam ''Agrobacterium''.<ref name="Madigan"/> ''Agrobacterium'' akan menghantarkan plasmid tersebut ke dalam sel tanaman melalui mekanisme tertentu sehingga sifat-sifat yang dikonstruksi dalam plasmid tersebut dapat diekspresikan oleh tanaman.<ref name="Madigan"/>. ''Agrobacterium'' LBA4404 merupakan jenis ''Agrobacterium'' komersial yang digunakan secara umum untuk proses transformasi.<ref name="Wang">{{en}} Wang K. 2006. ''Agrobacterium Protocol''. New Jersey: Humana Press.</ref> Bakteri jenis ini dapat dibuat menjadi bakteri yang [[kompeten]] dengan teknik elektroporasi.<ref name="Wang"/>. Elektroporasi merupakan salah satu cara untuk membuat [[membran sel]] lebih [[permeabel]] terhadap [[materi genetik]] dengan cara menggunakan arus listrik dalam waktu singkat.<ref name="Hall">{{en}}Hall RD. 1999. ''Plant Cell Culture Protocol''. New Jersey: Humana Press.</ref>