DNA komplemen: Perbedaan antara revisi
Konten dihapus Konten ditambahkan
Tidak ada ringkasan suntingan |
Tidak ada ringkasan suntingan Tag: BP2014 |
||
Baris 3:
==Sintesis==
sintesis cDNA untai pertama diperlukan untuk menstabilkan [[mRNA]] yang didapatkan dari hasil isolasi. sintesis cDNA ini dilakukan dengan mengunakan [[enzim]] "[[reverse transcriptase]] dan [[primer]] [[oligo dT]] yang akan menempel pada daerah [[ekor poli A]] yang merupakan ciri khas dari mRNA sehingga semua mRNA akan ditranskrip menjadi cDNA untai pertama sehingga selanjutnya dapat dilakukan [[PCR]] untuk pengecekan.
Dalam mensintesis cDNA total, diperlukan mRNA total sebagai template. mRNA eukariotik umumnya memiliki ujung 3’ yang telah mengalami poliadenilasi sehingga membentuk poly(A) tail, sedangkan tipe RNA lain seperti rRNA dan tRNA tidak memiliki bagian tersebut. Poli A pada ujung 3’ mRNA penting dalam proses purifikasi mRNA dari ekstrak total RNA tipe sel spesifik dan umumnya purifikasi dilakukan dengan menggunakan kolom kromatografi afinitas (Allison 2007).
| |||