Nanu lahir di [[Jakarta]] pada 16 November 1952. Ia adalah anak keenam dari tujuh bersaudara yang lahir dari ayah Jawa dan ibu Sunda.<ref>{{Cite news|url=https://manado.tribunnews.com/2021/06/18/masih-ingat-nanu-mulyono-salah-satu-personel-warkop-dki-terungkap-alasan-mundur-dari-grup-lawak?page=all |title=Masih Ingat Nanu Mulyono? Salah Satu Personel Warkop DKI, Terungkap Alasan Mundur dari Grup Lawak |last=Umar |first=Rhendi |date=18 Juni 2021 |work=[[Tribunnews|Tribunnews.com]] |publisher=Tribun Network (Kompas Gramedia) |access-date=27 Juni 2022 |language=id }}</ref> Ia kuliah di [[Universitas Indonesia]] jurusan [[sosiologi]].<ref name="SejarahWarkop">{{Cite news|url=https://lifestyle.sindonews.com/read/550286/187/sejarah-warkop-dki-pertama-kali-tampil-di-acara-perpisahan-smp-dengan-honor-rp20-ribu-1632492575 |title=Sejarah Warkop DKI, Pertama Kali Tampil di Acara Perpisahan SMP dengan Honor Rp20 Ribu |last=Hardiastuti |first=Wuri |date=24 September 2021 |work=[[Sindonews.com]] |publisher=[[Media Nusantara Citra|MNC Media]] |access-date=27 Jun1 2022 }}</ref> Saat kuliah dia adalah salah satu mahasiswa yang diajar oleh [[Dono (pelawak)|Dono]].<ref name="SejarahWarkop" /> Menurut catatan harian Dono, Nanu sempat tidak lulus kelas Dono karena sering bolos di kelas.<ref>[{{cite web |url=https://indonesiatoday.co.id/read/pernah-jadi-dosen-yang-galak-banget-dono-warkop-sampai-tidak-luluskan-anggota-warkop-463750 |title=Pernah Jadi Dosen yang Galak Banget Dono Warkop Sampai Tidak Luluskan Anggota Warkop]{{Webarchive|date=10 Juni 2022 |publisher=Indonesia Today |access-date=22 Juni 2022 |archive-url=https://web.archive.org/web/20220610024251/https://indonesiatoday.co.id/read/pernah-jadi-dosen-yang-galak-banget-dono-warkop-sampai-tidak-luluskan-anggota-warkop-463750 |archive-date=10 Juni 2022}} ''Indonesia Today''. Retrieved 5 Mei 2022.</ref> Nanu juga dikenal sebagai anggota Kelompok Mahasiswa Pencinta Alam Universitas Indonesia (Mapala UI) bersama Dono dan [[Kasino (pelawak)|Kasino]].<ref name="SejarahWarkop" /><ref>{{cite book|title=Warkop: main-main jadi bukan main|last=Badil|first=Rudi|authorlink=|year=2010|publisher=Kepustakaan Populer Gramedia}}</ref>
Nanu memulai karirnya dengan grup Warkop pada tahun 1973 di radio Prambors. Kemudian dilanjutkan dengan pemutaran film tahun 1979 berjudul ''[[Mana Tahaaan...]]'' sebelum kemudian memilih mundur dari grup dengan alasan ingin fokus pada hal lain.<ref>[{{cite web |url=https://www.suara.com/entertainment/2021/10/04/203803/9-potret-lawas-warkop-dki-formasi-awal-ternyata-berlima?page=all |title=9 Potret Lawas Warkop DKI, Formasi Awal Ternyata Berlima]{{Webarchive|author=Nabilla, Farah |date=4 Oktober 2021 |publisher=Suara.com |access-date=4 Oktober 2021 |archive-url=https://web.archive.org/web/20220505144346/https://www.suara.com/entertainment/2021/10/04/203803/9-potret-lawas-warkop-dki-formasi-awal-ternyata-berlima?page=all |archive-date=5 Mei 2022}} ''Suara.com''. Retrieved 5 Mei 2022.</ref> Selama menjadi anggota Warkop, Nanu memerankan tokoh Poltak yang digambarkan sebagai [[Suku Batak|orang Batak]].<ref>{{cite web |url=https://www.intipseleb.com/lokal/68091-tak-banyak-yang-tahu-ini-dia-sosok-nanu-moeljono-anggota-keempat-warkop-dki-yang-lucu-banget |title=Tak Banyak yang Tahu! Ini Dia Sosok Nanu Moeljono, Anggota Keempat Warkop DKI yang Lucu Banget! |author=Agnes |date=5 Mei 2023 |website=intipseleb.com |access-date=15 Juni 2023 |quote=Indro Warkop: ''Orang semua tahunya dia (Nanu) orang Batak, (saat) kita ke Medan, banyak yang datang ke asrama kita, saking takutnya dia disangka Batak beneran dibawa ke kampung segala macem, langsung berubah dia ... Bukan pak, saya Orang Betawi!'' |archive-date= |archive-url= |url-status=}}</ref> Ia kemudian bermain di film ''[[Kisah Cinta Rojali dan Zuleha]]'' di tahun yang sama yang kemudian menjadi peran film terakhirnya.<ref name="RojaliJuleha">{{cite web |url=http://filmindonesia.or.id/movie/title/lf-k025-79-962379_kisah-cinta-rojali-dan-zuleha#.Yrm9_uxBy00 |title=Kisah Cinta Rojali dan Zuleha |author=<!--Not stated--> |date= |website=filmindonesia.or.id |publisher= |access-date=27 Juni 2022 |quote= |archive-date=27 Februari 2021 |archive-url=https://web.archive.org/web/20210227070948/http://filmindonesia.or.id/movie/title/lf-k025-79-962379_kisah-cinta-rojali-dan-zuleha#.Yrm9_uxBy00 |url-status=live }}</ref>
