Operon lac: Perbedaan antara revisi

'''Operon''' ''''' lac''''' adalah [[operon]] yang dibutuhkan dalam transpor dan metabolisme dari [[laktosa]] di ''[[E.coli]]'' dan berbagai macam [[bakteri enterik]] lainnya.<ref name=jou>{{en}} Joung J, Ramm E, Pabo C (2000). "A bacterial two-hybrid selection system for studying protein-DNA and protein-protein interactions". Proc Natl Acad Sci USA 97 (13): 7382–7.</ref> Operon ''lac'' terdiri dari gen structural (''lacZ'', ''lacY'', dan ''lazZ''), situs [[operator]] , dan gen [[regulator]] yang terdiri dari [[lacCRP]], [[lacP]] , dan [[lacO]] yang merupakan situs pengikatan untuk [[reseptor protein cAMP]], [[RNA polimerase]], dan [[represor]] laktosa<ref name=sri>{{en}}Sristava, S. 2003. ''Understanding Bacteria''. Norwell: Springer</ref>.

 

Gen struktural dalam ''lac'' operon di[[transkripsi]] dalam bentuk [[mRNA]] [[polisistronik]] yang akan di[[translasi]]kan menjadi ketiga enzim tersebut<ref>Toole G, Toole S. 2004.''Essential A2 Biology for OCR''. Cheltenhem: Nelson thrones</ref>. Dengan diproduksinya ketiga enzim tersebut secara bersamaan, maka regulasi produk gen akan menjadi lebih efisien, karena tidak selamanya bakteri menggunakan laktosa sebagai sumber energinya, dan hanya digunakan ketika terdapat laktosa dalam jumlah banyak, sehingga tidak membuang [[biomassa]] sel hanya untuk mensintesa enzim-enzim tersebut. Transkripsi dimulai dari sebuah promoter (P''lac'')<ref name=win>{{en}}Windelspecht, Michael. 2007. ''Genetics 101''. Westport: ABC-CLIO</ref>.

 

 

Situs regulator laktosa memiliki satu gen struktural (''lacI'') dan satu situs pengontrolan (''lacP2''), dimana gen strukturalnya berperan untuk mengkodekan subunit tetramer [[represor]] laktosa, sementara [[situs pengontrolan]] berperan sebagai situs pengikatan RNA polimerase<ref name=sri/>. Pada keadaan tidak ada inducer, represor mengikat pada lacO secara sterik dan memblokir pengikatan RNA polimerase ke ''lacP2'' dan menghambat insiasi transkripsi dari operon laktosa.<ref name=kim>{{en}} Kimball J. 2006. The Operon. [terhubung berkala]. http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/L/LacOperon.html [23 Mar 2009].</ref> Represor juga berperan dalam pemblokiran transkripsi operon regulator laktosa, beserta dengan produksi dirinya sendiri atau disebut sebagai [[autorepresi]]<ref name=hooper>Hooper N, Hames D. 2000. ''Instant Notes in Biochemistry''. Oxford: Taylor & Francis</ref>.

 

Ketika terdapat inducer, seperti [[isopropil-β-D-tiogalaktosida]] ([[IPTG]]) ditambahkan kedalam media yang terdapat populasi bakteria pengkatabolit laktosa, operon laktosa akan aktif. Laju pembentukan β-galaktosidase, permease, dan transasetilase akan meningkat pesat sampai pada keadaan jenuh atau maksimum selama kondisi lingkungan tidak berubah<ref name=smo>Smolke, Christina. 2010. ''The Metabolic Pathway Engineering Handbook: Fundamentals''. New York: CRC Press</ref>. IPTG dapat diambil oleh bakteri, akibat aktivitas permease yang terbentuk karena level basal dari enzim dan akan tetap terkonsentrasi di [[membran plasma]]<ref name=bol/>. IPTG akan mengikat represor dan mengalami [[perubahan konformasi]], sehingga represor akan berada pada keadaan [[inaktif]]nya, dan tidak dapat mengikat ke operator lagi, sehingga RNA polimerase akan dengan mudah mengikat pada ''lacP'' dan meng[[inisiasi transkripsi]] tanpa adanya represor<ref name=hooper/>. Segera setelah RNA polimerase menginisiasi transkripsi, RNA polimerase yang lain akan langsung mengikat ke promoter dan memulai transkripsi lagi, sehingga akan terdapat banyak mRNA dari operon laktosa, tetapi translasi yang terjadi tidak dapat dilakukan seperti halnya pada transkripsi<ref name=bol/>. Translasi yang terjadi setelah mRNA pertama hanya akan dimulai ketika mRNA pertama selesal ditranslasi, tetapi masing-masing mRNA dapat ditranslasi berulang, sekitar 40-50 kali sehingga konsentrasi enzim yang terbentuk akan makin besar<ref name=bol>Bolsover SR, Shephard EA, White HA, Hyams JS. 2011. ''Cell Biology: A Short Course''. New Jersey: John Wiley & sons</ref>.

 

===Pengukuran aktivitas operon lac===

Dalam percobaannya untuk mendeteksi aktivitas operon laktosa, biasanya digunakan [[absorbansi cahaya]] untuk mengukur [[unit enzim]] yang terbentuk, seperti penambahan senyawa tidak berwarna [[ortho-nitrophenol galaktosida]] ([[ONPG]]) yang berfungsi untuk mengukur kadar β-galaktosidase yang akan menghasilkan warna kuning seiring waktu dan aktivitas enzimnya<ref name=panno/>. ONPG akan terpecah menjadi galaktosa dan [[nitrofenol]] yang berwarna kuning, tidak seperti IPTG, ONPG bukanlah ''inducer'' <ref name=smo/>

[[File:Reaksi ONPG dengan substrat.jpg|thumb|left|Larutan bening (kiri) merupakan larutan kontrol, tidak ada gula sederhana, larutan kuning (kanan) merupakan larutan gula sederhana yang diproduksi akibat pemecahan laktosa.]]

 

===Pentingnya regulasi operon dalam bakteri===

Jika biosintesa tidak diregulasi, maka sel akan dengan cepat terpenuhi dengan mRNA dan [[enzim]] yang tidak berguna karena [[sintesa]] dari molekul-molekul ini membutuhkan banyak [[energi]], sementara energi yang dibutuhkan untuk membuat molekul tersebut lebih baik dialokasikan untuk [[perbaikan sel]] ataupun [[reproduksi sel]]<ref name=jou/>. Selebihnya lagi, katabolisme berlebihan akan membuat banyak [[produk katabolit]] untuk keluar dari sel dan membutuhkan [[protein transport]] lebih banyak. Karena protein transport glukosa dan enzim katabolitnya diproduksi pada kadar yang tinggi, akan sangat tidak berguna untuk menginduksi operon untuk utilisasi gula lain, ketika terdapat glukosa sebagai sumber makanan. Karena alasan-alasan ini, maka regulasi untuk mengatur kadar mRNA, dan enzim dibutuhkan<ref name=panno>Panno J. 2005. ''The Cell: Evolution of the First Organism''. New York: Infobase Publishing</ref>

 

== Referensi ==

{{reflist}}