Sentrifugasi diferensial

Dalam biokimia dan biologi sel, sentrifugasi diferensial (juga dikenal sebagai sentrifugasi kecepatan diferensial) adalah prosedur umum yang digunakan untuk memisahkan organel dan partikel sub-seluler lainnya berdasarkan laju sedimentasinya. Meskipun sering diterapkan dalam analisis biologis, sentrifugasi diferensial adalah teknik umum yang juga cocok untuk pemurnian kasar pada partikel tersuspensi yang tidak hidup (misalnya nanopartikel, partikel koloid, virus). Dalam kasus tipikal di mana sentrifugasi diferensial digunakan untuk menganalisis fenomena biologis sel (misalnya distribusi organel), sampel jaringan pertama-tama dilisiskan untuk memecahkan membran sel dan melepaskan organel dan sitosol. Lisat kemudian mengalami sentrifugasi berulang, di mana partikel yang mengendap dengan cukup cepat pada gaya sentrifugal yang diberikan untuk waktu tertentu membentuk "pelet" yang kompak di bagian bawah tabung sentrifugasi.^[1]

Setelah setiap sentrifugasi, supernatan (larutan non-pelet) dikeluarkan dari tabung dan disentrifugasi ulang dengan gaya sentrifugal dan/atau waktu yang ditingkatkan. Sentrifugasi diferensial cocok digunakan untuk pemisahan minyak mentah berdasarkan laju sedimentasi, tetapi pemurnian yang lebih halus dapat dilakukan berdasarkan kerapatan melalui sentrifugasi gradien-kerapatan kesetimbangan.^[2] Dengan demikian, metode sentrifugasi diferensial adalah pemeletan partikel secara berurutan dari supernatan sebelumnya, dengan menggunakan gaya sentrifugasi yang semakin tinggi.^[3] Organel seluler yang dipisahkan dengan sentrifugasi diferensial mempertahankan tingkat fungsi normal yang relatif tinggi, selama tidak mengalami kondisi denaturasi selama isolasi.^[4]^[5]

Lihat pula sunting

Referensi sunting

^ Ohlendieck, Kay; Harding, Stephen E. (19 April 2018). "Centrifugation and Ultracentrifugation". Wilson and Walker's Principles and Techniques of Biochemistry and Molecular Biology: 424–453. doi:10.1017/9781316677056.014. ISBN 9781107162273.
^ Darnell, James; Baltimore, David; Matsudaira, Paul; Zipursky, S. Lawrence; Berk, Arnold; Lodish, Harvey (2000). "Purification of Cells and Their Parts".
^ Griffith, Owen Mitch (2010). Practical Techniques for Centrifugal Separations – Application Guide (PDF). Principles & Techniques of Biochemistry and Molecular Biology. hlm. 1-27. Diarsipkan dari versi asli (PDF) tanggal 7 Februari 2023. Diakses tanggal 4 Februari 2024.
^ Gerald Karp (19 Oktober 2009). Cell and Molecular Biology: Concepts and Experiments. John Wiley & Sons. hlm. 28–. ISBN 978-0-470-48337-4.
^ Livshits, Mikhail A.; Khomyakova, Elena; Evtushenko, Evgeniy G.; Lazarev, Vassili N.; Kulemin, Nikolay A.; Semina, Svetlana E.; Generozov, Edward V.; Govorun, Vadim M. (30 November 2015). "Isolation of exosomes by differential centrifugation: Theoretical analysis of a commonly used protocol". Scientific Reports (dalam bahasa Inggris). 5 (1): 17319. Bibcode:2015NatSR...517319L. doi:10.1038/srep17319  . ISSN 2045-2322. PMC 4663484  . PMID 26616523.

Artikel bertopik biokimia ini adalah sebuah rintisan. Anda dapat membantu Wikipedia dengan mengembangkannya.

[1] Ohlendieck, Kay; Harding, Stephen E. (19 April 2018). "Centrifugation and Ultracentrifugation". Wilson and Walker's Principles and Techniques of Biochemistry and Molecular Biology: 424–453. doi:10.1017/9781316677056.014. ISBN 9781107162273.

[darnell-2] Darnell, James; Baltimore, David; Matsudaira, Paul; Zipursky, S. Lawrence; Berk, Arnold; Lodish, Harvey (2000). "Purification of Cells and Their Parts".

[3] Griffith, Owen Mitch (2010). Practical Techniques for Centrifugal Separations – Application Guide (PDF). Principles & Techniques of Biochemistry and Molecular Biology. hlm. 1-27. Diarsipkan dari versi asli (PDF) tanggal 7 Februari 2023. Diakses tanggal 4 Februari 2024.

[4] Gerald Karp (19 Oktober 2009). Cell and Molecular Biology: Concepts and Experiments. John Wiley & Sons. hlm. 28–. ISBN 978-0-470-48337-4.

[5] Livshits, Mikhail A.; Khomyakova, Elena; Evtushenko, Evgeniy G.; Lazarev, Vassili N.; Kulemin, Nikolay A.; Semina, Svetlana E.; Generozov, Edward V.; Govorun, Vadim M. (30 November 2015). "Isolation of exosomes by differential centrifugation: Theoretical analysis of a commonly used protocol". Scientific Reports (dalam bahasa Inggris). 5 (1): 17319. Bibcode:2015NatSR...517319L. doi:10.1038/srep17319  . ISSN 2045-2322. PMC 4663484  . PMID 26616523.

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]